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泛素化结果图系列文档泛素化结果图(1) -底物蛋白的降解
E3泛素连接酶和底物蛋白in vitroandin vivo的相互作用
使用免疫共沉淀的方法检测两个蛋白质之间的相互作用。大致分为以下三种:
两个蛋白均为过表达,见图9和图10。
一个蛋白为过表达,另一个为內源蛋白质,见图11和图12。
两个蛋白均为內源蛋白质,见图13和图14。
图9 共转染Flag标记的E3泛素连接酶和Myc标记的底物蛋白24-48小时后,用Flag抗体IP E3泛素连接酶,用相应抗体IB检测相应蛋白质图10 共转染Flag标记的E3泛素连接酶和Myc标记的底物蛋白24-48小时后,用Myc抗体IP底物蛋白质,用相应抗体IB检测相应蛋白质图11 转染Flag标记的E3泛素连接酶24-48小时后,用Flag抗体IP E3泛素连接酶,用相应抗体IB检测相应蛋白质图12 转染Myc标记的底物蛋白质24-48小时后,用Myc抗体IP底物蛋白质,用相应抗体IB检测相应蛋白质图13 裂解细胞后,用E3泛素连接酶的抗体IP,用相应抗体IB检测相应蛋白质图14 裂解细胞后,用底物蛋白质的抗体IP,用相应抗体IB检测相应蛋白质
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